分析型超速離心技術（Analytical Ultracentrifugation，AUC）是表征生物大分子特性、研究生物分子理化性質的主要技術手段之一，用于分析樣品異質性、聚集體的形成以及分子間相互作用等。瑞典科學家Theoder Svedberg在1925年發(fā)明這一技術，并于第二年制造出第一臺分析型超速離心機。經過近百年的應用、驗證和發(fā)展，目前這一技術已廣泛應用于生物制藥、生命科學及高分子科學等研究領域。

貝克曼推出的Optima AUC分析型超速離心機由主機、光學系統(tǒng)、轉頭以及樣本池組件等構成，可以想象成是一臺制備型超速離心機和光學檢測系統(tǒng)的結合，但不同于制備型離心機，Optima AUC作為分析型儀器可以實時監(jiān)測樣品沉降過程中溶質濃度隨時間和距離的改變，從而計算得到分子特性。

分析型超速離心技術的分析方法主要有沉降速率（Sedimentation Velocity）和沉降平衡（Sedimentation Equilibrium）兩種。

沉降速率是一項流體動力學技術。沉降速率實驗中，樣品被高速旋轉，溶質分子向樣品池底部移動，通過記錄的數(shù)據(jù)來測定溶質分子運動的速率。運動速率用沉降系數(shù)表示，它取決于分子量、分子形狀或構象。對于不同組分的樣品，根據(jù)不同的沉降系數(shù)檢測每個組分。

沉降平衡是一項熱力學技術。沉降平衡試驗在較低的轉速下進行，當沉降作用與擴散作用達到平衡時測定分子平衡濃度的分布。在平衡狀態(tài)下，濃度的分布只決定于質量而與分子的形狀無關。離心開始時，分子顆粒發(fā)生沉降，一段時間以后，沉降的結果造成了濃度梯度，因而產生了蛋白質分子反向擴散運動，當反向擴散與離心沉降達到平衡時，濃度分布固定不變。

掃描得到沉降數(shù)據(jù)后，通過后續(xù)軟件分析可得到樣品表征結果，目前普遍應用SEDFIT/SEDPHAT分析軟件。下圖為沉降速率數(shù)據(jù)分析擬合后得到的c(S)分布圖，根據(jù)分析結果可精準檢測生物大分子聚集狀態(tài)以及聚集體準確百分比含量。

揭開了AUC的神秘面紗，我們已經了解到分析超速離心技術在蛋白藥物聚集體檢測方面有其*優(yōu)勢，不需要標準品與標記物，直接檢測終溶液中樣品狀態(tài)，更接近蛋白質真實生理狀態(tài)等。

AUC在表征抗體藥物特性時有如下多方面應用，具體應用實例介紹請關注下期內容！

●  精準檢測抗體藥物聚集體

●  抗體藥物制劑篩選

●  表征抗體偶聯(lián)藥物結合效率

●  抗原——抗體相互作用檢測

●  批次一致性檢測

* 以上涉及到所有產品僅用于科研和工業(yè)，不用于臨床診斷。

 點擊此處“閱讀全文”查看更多內容